Como para calcular o comprimento dos fragmentos de DNA

Os cientistas utilizar uma técnica chamada de electroforese em gel para determinar o comprimento dos fragmentos de ADN. Neste processo, as amostras desconhecidas e um padrão de ADN são colocadas em poços (pequenos furos) na margem de um gel. O padrão contém fragmentos de tamanhos conhecidos medidos em pares de bases. Uma corrente eléctrica faz com que os fragmentos de ADN mover localização ao longo do gel e as moléculas mais curtas de se mover mais. A distância percorrida e do tamanho de fragmentos padrão são plotados em papel semilogarítmico. O comprimento do fragmento desconhecido pode ser calculado através da comparação da distância percorrida pelo gráfico.

instruções

  • 1

    Obter a fotografia de um gel após electroforese. Os fragmentos de DNA são visualizados como bandas nas colunas conhecidos como carris.

  • 2

    Identifica a coluna contendo o ADN padrão. Esta molécula de ADN é cortado com uma enzima para produzir fragmentos de tamanho ou de peso molecular conhecido. que corresponde a cada pedaço banda deve aparecer.

  • 3

    Rotular cada fragmento com o tamanho do ADN padrão medido em pares de bases. Esta informação é fornecida com gel de electroforese ou fontes na literatura científica.

  • 4

    Medir a distância percorrida por fragmentos de ADN padrão, em milímetros. É medido a partir da parte dianteira do poço (o local onde o gel foi colocado a amostra) para a frente da tira de amostra formada no gel.

  • 5

    Inserir dados em uma tabela.

    curva padrão

  • 1

    Pegue um pedaço de papel gráfico semilogarítmico em que você pode desenhar uma curva padrão para o DNA padrão. O papel semilogarítmico tem uma escala linear no de um eixo e uma escala logarítmica, no outro eixo. Isto permite-lhe traçar o logaritmo da distância percorrida sem calcular.

  • 2

    Rotular o eixo X, com a distância percorrida pelos fragmentos de ADN em milímetros. A escala do eixo-X a ser linear.

  • 3

    Rotular o eixo Y com o tamanho dos fragmentos de ADN em pares de bases. escala do eixo Y deve ser logarítmica.

  • 4

    Traço distância percorrida e de tamanho de fragmentos de ADN padrão no gráfico.

  • 5

    Ligar os pontos com a linha que melhor se encaixa para criar uma curva padrão. Isso é chamado de curva padrão, mas a linha deve ser reto.

    Os fragmentos de ADN desconhecido

  • 1

    Ele mede a distância percorrida por fragmentos de DNA desconhecidos em milímetros.

  • 2

    Localizar a distância percorrida por fragmentos desconhecidos no eixo dos X do gráfico.

  • 3

    Desenhar uma linha vertical a partir daquele ponto no eixo X e para a curva padrão.

  • 4

    Desenhar uma linha horizontal a partir do ponto de intersecção com a curva para o eixo Y Este é o tamanho do fragmento desconhecido em pares de bases.